1、原理
本速測(cè)卡采用競(jìng)爭(zhēng)法的膠體金免疫層析原理快速檢測(cè)小麥、大麥、水稻、大米和玉米等
及其制品中的黃曲霉毒素B1(AFB1)的含量。本速測(cè)卡的檢測(cè)限為5 μg/kg。
2、試劑盒組成
2.1 塑料吸管(規(guī)格1 ml) 10/20/40 支
2.2 樣品瓶(規(guī)格5 ml) 10/20/40 瓶(藍(lán)蓋瓶)
2.3 緩沖液瓶(規(guī)格5/7 ml) 2/3/6 ml/瓶1 瓶(紅蓋瓶)
2.4 速測(cè)卡10/20/40 條
2.5 10 ml 離心管10/20/40 個(gè)
2.6 操作說(shuō)明書(shū)1 份
3、貯存條件與有效期
速測(cè)卡2-8℃密封避光保存,有效期為6 個(gè)月,生產(chǎn)日期見(jiàn)試劑盒外包裝。
4、自備材料
小型粉碎機(jī)、0.1 g 天平、甲醇(分析純)、蒸餾水。
5、樣品提取及檢測(cè)步驟
5.1 限量為5 μg/kg的樣品(如小麥、大麥及其它谷物)檢測(cè)
5.1.1 稱(chēng)1 g 有代表性的粉碎樣品加入到10 ml 離心管中,然后向離心管中加入3 ml 50%的
甲醇-水(V 甲醇/V 水=1:1),震蕩提取2 分鐘,靜置1 分鐘。
5.1.2 用塑料吸管取1 ml 蒸餾水或純凈水于樣品瓶中(藍(lán)蓋瓶),再?gòu)碾x心管中取0.5 ml 上
清液加入樣品瓶中(每個(gè)樣品用一支吸管),充分混勻,此提取液標(biāo)記為1 號(hào)
5.1.3 將上述1 號(hào)提取液500 μl 用15%甲醇(V 甲醇/V 水=15:85)稀釋至2 倍,即500 μl 1 號(hào)
提取液加500 μl 15%甲醇-水溶液稀釋?zhuān)跇悠菲恐谐浞只靹颉?br />5.1.4 向樣品瓶(藍(lán)蓋瓶)滴入4 滴緩沖液(紅蓋瓶),充分混勻,此為待檢樣品提取液。
5.1.5 滴入3 滴待檢樣品提取液于速測(cè)卡樣品區(qū)(S 區(qū))域內(nèi),10 分鐘判讀檢測(cè)結(jié)果。
5.2 限量為10 μg/kg的樣品(如稻谷、糙米、大米)檢測(cè)
5.2.1 稱(chēng)1 g 有代表性的粉碎樣品加入到10 ml 離心管中,然后向離心管中加入3 ml 50%的
甲醇-水(V 甲醇/V 水=1:1),震蕩提取2 分鐘,靜置1 分鐘。
5.2.2 用塑料吸管取1 ml 蒸餾水或純凈水于樣品瓶中(藍(lán)蓋瓶),再?gòu)碾x心管中取0.5 ml 上
清液加入樣品瓶中(每個(gè)樣品用一支吸管),充分混勻,此提取液標(biāo)記為2 號(hào)。
5.2.3 將上述1 號(hào)提取液250 μl 用15%甲醇(V 甲醇/V 水=15:85)稀釋至4 倍,即250 μl 2 號(hào)
提取液加750 μl 15%甲醇-水溶液稀釋?zhuān)跇悠菲恐谐浞只靹颉?br />5.2.4 向樣品瓶(藍(lán)蓋瓶)滴入4 滴緩沖液(紅蓋瓶),充分混勻,此為待檢樣品提取液。
5.2.5 滴入3 滴待檢樣品提取液于速測(cè)卡樣品區(qū)(S 區(qū))域內(nèi),10 分鐘判讀檢測(cè)結(jié)果。
5.3 限量為20 μg/kg的樣品(如玉米)檢測(cè)
5.3.1 稱(chēng)1 g 有代表性的粉碎樣品加入到10 ml 離心管中,然后向離心管中加入3 ml 50%的
甲醇-水(V 甲醇/V 水=1:1),震蕩提取2 分鐘,靜置1 分鐘。
5.3.2 用塑料吸管取1 ml 蒸餾水或純凈水于樣品瓶中(藍(lán)蓋瓶),再?gòu)碾x心管中取0.5 ml 上
清液加入樣品瓶中(每個(gè)樣品用一支吸管),充分混勻,此提取液標(biāo)記為3 號(hào)。
5.3.3 將上述3 號(hào)提取液125 μl 用15%甲醇(V 甲醇/V 水=15:85)稀釋至8 倍,即125 μl 3 號(hào)
提取液加875 μl 15%甲醇-水溶液稀釋?zhuān)跇悠菲恐谐浞只靹颉?br />5.3.4 向樣品瓶(藍(lán)蓋瓶)滴入4 滴緩沖液(紅蓋瓶),充分混勻,此為待檢樣品提取液。
5.3.5 滴入3 滴待檢樣品提取液于速測(cè)卡樣品區(qū)(S 區(qū))域內(nèi),10 分鐘判讀檢測(cè)結(jié)果。
6、檢測(cè)結(jié)果的判讀
6.1 陰性:C 線(xiàn)顯色,T 線(xiàn)顯色,判為陰性。
6.2 陽(yáng)性:C 線(xiàn)顯色,T 線(xiàn)不顯色,判為陽(yáng)性。
6.3 無(wú)效:C 線(xiàn)不顯色,無(wú)論T 線(xiàn)是否顯色,判為無(wú)效。
注:陰性表明樣品AFB1 含量小于相應(yīng)的限量值。陰性陽(yáng)性無(wú)效無(wú)效
陽(yáng)性表明樣品AFB1 含量大于或等于相應(yīng)的限量值。
7、注意事項(xiàng)
7.1 防止樣品提取過(guò)程中的交叉污染,樣品提取后須及時(shí)檢測(cè)。
7.2 緩沖液于室溫下復(fù)溫約20 分鐘,并搖勻。
7.3 步驟5 中的樣品提取液與緩沖液需充分混勻,且每個(gè)步驟操作速度要快。